Pierwszy raz postać Myszki Miki pojawiła się w filmie Plane Crazy z 15 maja 1928 r. W tym samym roku na ekranie kina Colony w Nowym Jorku miał premierę pierwszy animowany film dźwiękowy pt. Parowiec Willie (Steamboat Willie) z 18 listopada 1928. Głosu postaci Myszki Miki udzielił sam Walt Disney, który w 1931/1932 otrzymał za jej stworzenie Oscara. Na początku lat 30. Mickey i jego przyjaciele nabrali barw dzięki Technicolorowi. Rywalem Mikiego do ręki Minnie w filmie Mickey's Rival (1936) był Mortimer – mysz, a właściwie postać myszopodobna. Mortimer to imię, jakie pierwotnie miał nosić Miki, jednak żona Disneya, Lillian, zasugerowała mężowi imię „Mickey”, ponieważ „Mortimer” brzmiało jej zdaniem zbyt „dziewczęco”. W 1940 Mickey zagrał w nagrodzonym Oscarem pełnometrażowym filmie Fantazja.